抗精子抗体的检测方法

发表日期:2019-10-25 | 来源:24个节气养生

  在进行抗精子抗体检测之前,有几个基本概念需要说明。

  (1)由于精子抗原的复杂性决定了相应抗体的多样性,试图用一种检测方法检出全部抗体是不可能的。

  (2)随着生殖生物学和免疫学的进步,新的检测方法不断创立,至目前为止,抗精子抗体检测方法已有 10多种,应根据临床或研究目的、抗原定位以及与不孕、不育的关系等进行选择。

  (3)目前,在众多检测方法中,没有一种是对不孕症完全特异的抗体检测法,因为与精子结合的抗体,不一定都能造成精子生物功能障碍。临床关注的是与不孕症呈因果关系的抗体。对这类抗体的检测,女方主要检查女性血清中与精子膜抗原发生反应的湖南哪找治疗癫痫病效果好的医院抗体,检测方法多用免疫珠法和 MAR 试验进行筛选,然后用精子制动化试验和体外受精阻断试验作进一步鉴定。男性方面,主要也是检查与精子膜抗原反应的抗体,除进行免疫珠检测、MAR 试验外,可以用凝集试验、制动化试验、受精阻断试验来确定抗体的生物学活动。

  (4)抗精子抗体检测法的分类,当前还没有统一,但分类的原则主要是根据抗体的生物活性;抗体与活精子膜抗原的结合性和与精子及其提取抗原的反应性。有人分为 2 类,亦有人分为 3类。在此,引述 1993年繁田实采用的分类表供参考(表 9-1)。

  表 9-1 抗精子抗体的检测方法

  A.与精子及其提取抗原反应得了癫痫怎么才能治好的抗体检测法

  1.致敏血球凝集反应

  2.间接荧光抗体法

  3.放射性核素标记测定法

  4.酶联免疫吸附法

  B.与运动精子膜抗原结合的抗体检测法

  1.检测与抗原结合性的方法

  (1)免疫珠测定法

  (2)混合抗球蛋白反应试验(MAR)

  2.检测抗原结合性及抗体生物活性方法

  (1)精子凝集试验

  (2)精子制动化试验

  (3)受精阻断试验

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  注:A 法以固定精子作抗原,适用于间接荧光法和 ELISA 法等。

  B 法以活精子膜糖蛋白作抗原,适用于与膜抗原反应的抗体检查。

  一、精子凝集试验

  精子凝集试验从最初由 Kibrik等(1952年)创立的白明胶内精子凝集试验开始连同其后的发展,一共有 4 种:① 明胶凝集试验(Kibrik,1952);② 试管玻片凝集试验(Franklin,Dukes,1964);③ 毛 细 管 凝 集 试 验(Shulman,Hekman,Pann,1971);④ 浅 盘 凝 集 试 验(Friberg,1974)。

  西安看癫痫病哪家有名(一)明胶凝集试验(gelatin agglutination test,GAT)

  【准备】

  (1)配制 Baker液(Bakersolution)

  葡萄糖3.00gNa2HPO4·7H2O0.46g

  NaCl0.20gKH2PO40.01g

  加双蒸水至 100mL。

  (2)用 Baker液配制 10% 白明胶溶液,并置 37℃ 水浴中备用。

  (3)精子悬浮液:取正常新鲜精液(精子密度为 80×106/mL 左右,活动率

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